ABSTRACT A description is provided for the first time of a series of nine cases with a clinical examination suggestive of leptospirosis in the municipality of Puerto Nariño, Department of Amazonas, Colombia. Serological evidence is presented of exposure to Rickettsia, spotted fever group. The cases were clinically considered as febrile syndrome of unknown origin. Infection with dengue or malaria was ruled out. Diagnosis of leptospirosis was achieved by real-time polymerase chain reaction. Additionally, indirect immunofluorescence detected the presence of antibodies against rickettsia, spotted fever group. Finally, a review was conducted about the topic.

RESUMEN Se describe por primera vez una serie de nueve casos con clínica indicativa de leptospirosis en el municipio Puerto Nariño en el departamento Amazonas, Colombia. Se muestran evidencias serológicas de exposición con Rickettsia del grupo de las fiebres manchadas. Los casos fueron clínicamente considerados como síndrome febril de origen desconocido. Se descartó infección por dengue y malaria. El diagnóstico de Leptospira se realizó mediante el método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. Igualmente, se detectó la presencia de anticuerpos contra rickettsias del grupo de las fiebres manchadas por inmunofluorescencia Indirecta. Finalmente, se realiza revisión del tema.

Resumen Introducción. El ADN mitocondrial ha demostrado su utilidad para el estudio de la evolución en los insectos. Existen algunos genes mitocondriales como el citocromo b (Cytb) y el gen de transferencia para el aminoácido serina (SertRNA) que pueden usarse en el diagnóstico de especies estrechamente relacionadas. Objetivo. Explorar la utilidad filogenética de la región Cytb-SertRNA-IG1-ND1 para detectar posibles especies crípticas en Anopheles neivai. Materiales y métodos. Se recolectaron especímenes en Colombia, Guatemala y en la localidad tipo en Panamá, los cuales se secuenciaron y se compararon mediante el polimorfismo de ADN en toda la región y mediante la simulación de estructuras secundarias del gen SertRNA. Resultados. Se obtuvieron las secuencias de especímenes de A. neivai (34) y A. pholidotus (2). Conclusiones. Se detectaron algunos polimorfismos para la regiónCytb-SertRNA-IG1-ND1 en A. neivai, pero no así especies crípticas.

Abstract Introduction: Mitochondrial DNA has proven its utility for the study of insect evolution. Genes such as cytochrome b (Cytb) and the transfer gene for serine (SertRNA) can be used to compare closely related organisms. Objective: The phylogenetic utility of Cytb-SertRNA-IG1-ND1 was tested for polymorphisms, and secondary structure modeling in SertRNA was done to detect possible cryptic species in Anopheles neivai. Materials and methods: Specimens from Colombia, Guatemala, and the type locality in Panamá were collected and sequenced for specimen comparison based on DNA polymorphisms, and secondary structure modeling for the SertRNA gene. Results: Thirty-six sequences for A. neivai and A. pholidotus were obtained. Conclusions: Polymorphic variants were detected in A. neivai for Cytb-SertRNA-IG1- ND1. Despite this variation in A. neivai, cryptic species could not be detected.

ABSTRACT INTRODUCTION: Cutaneous leishmaniasis (CL) is a tropical disease that affects millions of individuals worldwide. The current drugs for CL may be effective but have serious side effects; hence, alternatives are urgently needed. Although plant-derived materials are used for the treatment of various diseases in 80% of the global population, the validation of these products is essential. Gelatin capsules containing dried Artemisia annua leaf powder were recently developed as a new herbal formulation (totum) for the oral treatment of malaria and other parasitic diseases. Here, we aimed to determine the usefulness of A. annua gel capsules in CL. METHODS: The antileishmanial activity and cytotoxicity of A. annua L. capsules was determined via in vitro and in vivo studies. Moreover, a preliminary evaluation of its therapeutic potential as antileishmanial treatment in humans was conducted in 2 patients with uncomplicated CL. RESULTS: Artemisia annua capsules showed moderate in vitro activity in amastigotes of Leishmania (Viannia) panamensis; no cytotoxicity in U-937 macrophages or genotoxicity in human lymphocytes was observed. Five of 6 (83.3%) hamsters treated with A. annua capsules (500mg/kg/day) for 30 days were cured, and the 2 examined patients were cured 45 days after initiation of treatment with 30g of A. annua capsules, without any adverse reactions. Both patients remained disease-free 26 and 24 months after treatment completion. CONCLUSION: Capsules of A. annua L. represent an effective treatment for uncomplicated CL, although further randomized controlled trials are needed to validate its efficacy and safety.

El objetivo de la investigación fue determinar la prevalencia de anticuerpos anti-Leishmania en perros del departamento de Sucre, Colombia. Se analizaron 122 perros del área rural de los municipios de Ovejas, Sampués y Sincelejo, mediante la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Anticuerpos anti-Leishmania fueron detectados en el 69,6 % (IC95 % = 61,1 - 78,2) de la población canina estudiada. En el municipio de Sincelejo la seropositividad fue del 72 % (IC95 % = 61,1 - 82,8), en el municipio de Sampués del 68,4 % (IC95 % = 52,3 - 84,5) y en el municipio de Ovejas del 55,5 % (IC95 % = 21,2 - 86,3). Los animales seropositivos fueron principalmente caninos jóvenes y adultos. El 17,6 % de los perros seropositivos mostró signos clínicos compatibles con leishmaniasis canina, entre los cuales la onicogrifosis, alopecia y caquexia fueron los más comunes. La alta frecuencia de caninos con anticuerpos a Leishmania detectada en el presente estudio, pone de manifiesto la hiperendemicidad de la leishmaniasis canina en esta zona del país, así como el alto riesgo de brotes epidémicos de la enfermedad.

The aim of this survey wasto determine prevalence of antibodies against Leishmania in dogs from Sucre, Colombia. We analyzed 122 dogs in rural areas from municipalities of Sampués, Ovejas and Sincelejo, by indirect immunofluorescence (IFA). Anti-Leishmania antibodies were detected in 69.6 % (95 % CI = 61.1 to 78.2) of the selected canine population. In the municipality of Sincelejo, Sampues and Ovejas, the seropositivities were 72 % (95 % CI = 61.1 to 82.8), 68.4 % (95 % CI = 52.3 to 84.5) and 55.5 % (95 % CI = 21.2 to 86.3) respectively. Seropositive animals were mainly young and adult dogs. The 17.6 % of seropositive dogs showed clinical signs compatible with canine leishmaniasis; onychogryphosis, alopecia and cachexia were the most common ones. The detected high frequency of canines with antibodies against Leishmania in the present study, highlights the hyperendemicity status of canine leishmaniasis in this area of the country and the high risk of disease outbreaks.

Se presenta una lista actualizada de especies de flebotomíneos en zonas cafeteras de la región andina colombiana. Con base en la revisión y verificación taxonómica, se registraron 53 especies presentes en 12 departamentos. Además de los registros obtenidos con base en un muestreo intensivo en cinco departamentos, se recopilaron los datos existentes en trabajos publicados y en la revision taxonómica de los especímenes de la zona pertenecientes a la colección entomológica del Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET). El listado comprende los géneros Brumptomyia (2 especies), Lutzomyia (50 especies) y Warileya (1 especie). Con base en este trabajo se confirmaron 11 nuevos registros de especies en la región cafetera colombiana, entre los cuales es relevante Lutzomyia panamensis , especie de importancia médica no registrada previamente en esta zona. En total, 18 especies de las registradas poseen hábitos antropofílicos o están relacionadas con la transmisión de Leishmania spp.

An updated list of phlebotomine sand flies species in coffee growing areas in the Colombian Andean region is presented. Fifty three species were reported from 12 departments. In addition, species distribution in the region was derived from specimens obtained during intensive field work in five departments, from previously published studies and from the taxonomic revision of specimens in the entomological collection of the Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET). The list includes the genera Brumptomyia (2 species), Lutzomyia (50 species) and Warileya (1 species). The updated list contains eleven new records in the region under study, including Lutzomyia panamensis , a species of medical importance not recorded previously in this zone. Eighteen of the species are considered to be anthropophilic, and many of them have been implicated in the transmission of leishmaniasis.

Introducción. En Colombia, la diversidad de flebotomíneos es alta, con 162 especies registradas que incluyen especies vectoras de Leishmania spp. Objetivo. Identificar las especies de flebotomíneos de importancia médica dentro del área de influencia del Proyecto Hidroeléctrico del río Amoyá, Colombia. Materiales y métodos. Los flebotomíneos fueron recolectados con trampas de luz de tipo CDC,Shannon y adhesivas, en 15 veredas del municipio de Chaparral, departamento de Tolima. Resultados. Un total de 1.077 especímenes adultos de flebotomíneos fueron recolectados e identificados como pertenecientes a 13 especies del género Lutzomyia França, 1924 y una especie del género Warileya Hertig, 1948. Entre las especies del género Lutzomyia recolectadas, Lu. longiflocosa (Morales, Osorno y Muñoz, 1970), Lu. columbiana (Ristorcelli y Van Ty, 1941)yLu. nuneztovari (Ortiz, 1954) son importantes por sus historiales epidemiológicos. Se resalta por primera vez la presencia de Lu. suapiensis (Le Pont, Torrez-Espejo y Dujardin, 1997) en Colombia y de Warileyarotundipennis (Fairchild y Herting, 1951) en el departamento de Tolima. Conclusión. Este estudio contribuye al conocimiento de la distribución geográfica de la subfamilia Phlebotominae en Colombia y favorece localmente a la comprensión de la riqueza y taxonomía de estos insectos, para un mejor entendimiento de la transmisión de la leishmaniasis en el municipio de Chaparral.

Introduction. In Colombia, the diversity of phlebotomine sand flies is high, with 162 recorded species, and which include vectors of Leishmania spp. Objective. To identify the sand fly species of medically importancein the area of influence from Amoyá River Hydroelectric Project, Colombia. Materials and methods. Sand flies were collected with CDC lighttraps, Shannon traps and sticky traps, from 15 villages in Chaparral County,Tolima. Results. A total of 1,077 adult sand fly specimens were collected. Thirteen species were found in the genus Lutzomyiaand one species in the genusWarileya.Among the Lutzomyia species, three species--Lutzomyia longiflocosa, Lutzomyia columbianaandLutzomyia nuneztovari--are important for their epidemiological history.Lutzomyiasuapiensiswas a new record for Colombia, and Warileya rotundipennis was recorded for the first time in Tolima. Conclusions. This study contributed to an increased knowledge of Colombian sand flies in terms of (1) expanding the geographical distribution of members of the subfamily Phlebotominae, (2) gaining estimates of species-richness and species associations in central Colombia, and (3) providing a better understanding of epidemiology of leishmaniasis in theChaparral area.

Introducción. El tratamiento de la enfermedad de Chagas está basado en sólo dos medicamentos de eficacia limitada y con importantes efectos colaterales. La gran biodiversidad de la flora colombiana hace de la bioprospección una alternativa potencial en la búsqueda de nuevos antiparasitarios. Objetivo. Evaluar in vitro el potencial tripanocida y la citotoxicidad de extractos obtenidos de 23 plantas colombianas. Materiales y métodos. Se obtuvieron extractos de hojas, de tallos o de la planta entera, en solventes de diferente polaridad. La actividad contra epimastigotes y la citotoxicidad se evaluaron por el micrométodo enzimático con MTT. Los extractos activos contra epimastigotes y con baja citotoxicidad se evaluaron también en tripomastigotes y amastigotes intracelulares. Resultados. Se reporta la actividad tripanocida de 13 plantas colombianas y se confirma el efecto biológico de cuatro especies previamente evaluadas. Cuatro extractos activos en epimastigotes también fueron activos en tripomastigotes y, uno de ellos, en amastigotes. Este extracto fue aislado de la planta Hieronyma antioquensis, y presentó CI50 de 3,125, 11,48 y 2,85 µg/ml, e índices de selectividad de 25,7 y 27, para epimastigotes, tripomastigotes y amastigotes, respectivamente. Los resultados sugieren que este extracto es un candidato promisorio para el tratamiento de la enfermedad de Chagas. Conclusión. La flora colombiana es una fuente potencial de nuevas sustancias para la quimioterapia contra la enfermedad de Chagas. El micrométodo enzimático con MTT es una herramienta útil para la tamización de la actividad biológica en epimastigotes y posterior selección para ensayos con otros estadios del parásito.

Introduction. The treatment of Chagas disease is based on only two drugs with limited efficacy and significant side effects. The rich biodiversity of the Colombian flora makes bio-prospecting a potential alternative in the search for new antiparasitic drugs. Objective. Potential trypanocidal activity and cytotoxicity was assessed in extracts from 23 Colombian plants. Materials and methods. Extracts of leaves, stems, or of the whole plants were obtained in solvents of a range of polarities. The activity against Trypanosoma cruzi epimastigotes and the cytotoxicity were evaluated by the MTT enzymatic micro-method. Extracts active against epimastigotes and with lowcytotoxicity were also tested on trypomastigotes and intracellular amastigotes. Results. Among the extracts, biological activity was confirmed in 4 species. The extracts were active on epimastigotes and trypomastigotes; one was active also against amastigotes. The latter extract was isolated from the plant Hieronyma antioquensis and presented IC50 of 3.1 mg/ml for epimastigotes, 11.5mg/ml for trypomastigotes and 2.9 mg/ml for amastigotes. The selectivity indexes were 25, 7, and 27 respectively. Conclusions. The extract from H. antioquensis proved a promising candidate for Chagas disease treatment. Futhermore, the MTT enzymatic micromethod was a useful tool for screening biological activity on epimastigotes and other stages of the parasite for further extract trials.

Lutzomyia trinidadensis (Newstead, 1922), L. bettinii Feliciangeli, Ramírez-Pérez & Ramírez, 1988, L. flaviscutellata (Mangabeira, 1942), L. yuilli Young & Porter, 1972, L. saulensis (Floch & Abonnenc, 1944), L. runoides (Fairchild & Hertig, 1953), L. ayrozai (Barretto & Coutinho, 1940), L. claustrei Abonnenc, Leger & Fauran, 1979, L. walkeri (Newstead, 1914), L. preclara Young & Arias, 1984, L. (geniculata) sp., L. (squamiventris) sp., and L. (Evandromyia) sp., are recorded for the first time in the department of Vichada, Colombia. In addition, the presence of L. antunesi (Coutinho, 1939) and L. aragaoi (Costa Lima, 1932) in this department is confirmed. Sand flies were collected in the municipalities of Puerto Carreño, Cumaribo, and La Primavera, using CDC light traps, Shannon trap, and human bait, and by active search in resting places. The epidemiological importance of these sand fly species is discussed in relation with the cutaneous leishmaniasis.

Se informa el primer hallazgo de Lutzomyia trinidadensis (Newstead, 1922), L. bettinii Feliciangeli, Ramírez-Pérez & Ramírez, 1988, L. flaviscutellata (Mangabeira, 1942), L. yuilli Young & Porter, 1972, L. saulensis (Floch & Abonnenc, 1944), L. runoides (Fairchild & Hertig, 1953), L. ayrozai (Barretto & Coutinho, 1940), L. claustrei Abonnenc, Leger & Fauran, 1979, L. walkeri (Newstead, 1914), L. preclara Young & Arias, 1984, L. (geniculata) sp., L. (squamiventris) sp., y L. (Evandromyia) sp., en el departamento de Vichada, Colombia. También se confirma la presencia de L. antunesi (Coutinho, 1939) y L. aragaoi (Costa Lima, 1932) en este departamento. Los flebotomíneos fueron recolectados en los municipios de Puerto Carreño, Cumaribo, y La Primavera, con trampas de luz tipo CDC, trampa Shannon y atrayente humano, y mediante búsqueda activa en lugares de reposo. Se discute la importancia epidemiológica de estas especies de flebotomíneos en relación con la leishmaniosis cutánea.

Introducción. En estudios previos se han encontrado prevalencias hasta de 90% de fasciolosis hepática en el ganado bovino del valle de San Nicolás en el oriente antioqueño. Objetivo. En este estudio se determinó la presencia de infestación en la población humana que está en contacto con el ganado de la región. Materiales y métodos. La presencia de anticuerpos en muestras de suero de 61 personas residentes de la zona y cuyos trabajos exigían contacto constante con ganado bovino, se determinó mediante una prueba tipo ELISA específica para Fasciola. hepatica. También se determinaron las conductas de riesgo para la adquisición del parásito, al igual que los antecedentes clínicos para la población estudiada. Resultados. Tres de los 61 sueros fueron positivos para la presencia de anticuerpos es-pecíficos para F. hepatica que corresponde a una prevalencia de infestación de 4,9%. Los tres individuos con muestras positivas relataron manipular pastos para ganadería y beber agua de las quebradas aledañas a las zonas de pastoreo. Sólo una de las personas con suero positivo refirió haber presentado ictericia en los últimos seis meses. Conclusiones Los resultados documentan la presencia de F. hepatica en la población humana que se encuentra en contacto con ganado infectado y permiten identificar las conductas de riesgo para la adquisición de la enfermedad en los habitantes de la zona. Es importante conocer la incidencia y prevalencia de la infestación, tanto en la población humana como animal, para adoptar medidas de prevención de las personas que están en contacto con el ganado enfermo, así como para tratar las personas enfermas.

Introduction: The Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET) at the Universidad de Antioquia has found a prevalence of 90% of hepatic fasciolasis in cattle from valle de San Nicolás, eastern Antioquia. Objective: In this study the presence of infection in the human population that is in contact with livestock was determined. Materials and methods: The presence of antibodies in serum samples from 61 residents of the area and whose jobs require constant contact with cattle was determined by an ELISA test. Risk behaviors for acquisition of the parasite as well as the clinical and symptoms for the study population were also determined. Results: Three of the 61 sera tested were positive for the presence of specific antibodies to F. hepatica, corresponding to a prevalence of infection of 4.9%. These three subjects reported manipulating pasture for livestock and drinking water from streams near grazing fields. Only one person referred jaundice in the last six months. Conclusions: The findings of this study document the presence of F. hepatica in the human population that is in contact with infected livestock and identify the risk behaviors for acquisition of the disease among the inhabitants of the area. It is important to know the incidence and prevalence of infection in both human and animal population, to adopt preventive measures for those that are in contact with sick cattle, and treatment of infected people.

Lutzomyia evansi (Núñez-Tovar) is the vector of the parasite Leishmania infantum in rural zones of Northern Colombia. An attempt was made to determine the origin of a recently detected urban population of Lutzomyia evansi by genetically characterizing specimens from seven geographically distinct localities in the Colombian Caribbean. Insect specimens were collected in rural and urban environments of areas endemic for visceral leishmaniasis or free of the disease. Nine polymorphic sites, nine nucleotide haplotypes and a single aminoacid haplotype were found within the 315 bp fragment sequenced, corresponding to the 3' end of the cytochrome b mitochondrial gene. Paired genetic distances between the haplotypes, estimated with the Kimura two-parameters model, varied from 0,0032-0,0194. Analysis revealed low genetic variability between specimens from urban and rural localities. Several of the sand flies collected in the city of Sincelejo (department of Sucre), where autochthonous visceral leishmaniasis cases have appeared in recent years, were genetically similar to those of a rural focus of the disease (El Contento, on the neighboring department of Córdoba). The epidemiological implications of this finding for Leishmania infantum transmission in the Colombian Caribbean are discussed.

Lutzomyia evansi (Núñez-Tovar) es el insecto transmisor del parásito Leishmania infantum en zonas rurales del norte de Colombia. Con el propósito de establecer el probable origen de una población urbana del vector, detectada en años recientes, se caracterizaron genéticamente ejemplares de Lutzomyia evansi de siete localidades geográficas del Caribe Colombiano. Los flebotomíneos fueron recolectados en ambientes rurales y urbanos de zonas endémicas y no endémicas de leishmaniasis visceral. Dentro del fragmento secuenciado de 315 pb correspondiente al extremo 3' del gen mitocondrial citocromo b, se encontraron nueve sitios polimórficos, nueve haplotipos nucleotídicos y un solo haplotipo aminoacídico. Las distancias genéticas pareadas entre los haplotipos, estimadas con el modelo de Kimura de dos parámetros, oscilaron entre 0,0032 y 0,0194. El análisis reveló la existencia de una baja variabilidad genética entre especímenes de localidades urbanas y rurales. Varios de los flebotomíneos recolectados en la zona urbana de la ciudad de Sincelejo, departamento de Sucre, donde en años recientes aparecieron casos autóctonos de leishmaniasis visceral, fueron genéticamente similares a los de El Contento, en el cercano departamento de Córdoba, foco rural de la enfermedad. Se discuten las implicaciones epidemiológicas de este hallazgo para la transmisión de Leishmania infantum en el Caribe Colombiano.

Diverse morphological anomalies in five different species of Lutzomyia França (Diptera: Pychodidae) are described and illustrated. These theratologies are observed in various structures important for the taxonomic identification of the species. The different individuals that belong to the species L. columbiana, L. hartmanni, L. reburra, L. ayrozai and L. panamensis were captured in diverse departments in Colombia.

Se describen e ilustran diversos casos de anomalías morfológicas de cinco diferentes especies de Lutzomyia França (Diptera Psychodidae). Estas teratologías se observan en varias estructuras importantes para la identificación taxonómica de dichas especies. Los diferentes individuos pertenecientes a las especies L. columbiana, L. hartmanni, L. reburra, L. ayrozai y L. panamensis fueron capturados en diversos departamentos en Colombia.

To date, 143 species of Lutzomyia França are recorded in Colombia, but less than 7% is incriminated in the transmission of Leishmania spp. Alternative taxonomic characters are necessary to correctly identify the particular sand fly fauna in each Colombian region, and the separation of morphologically similar vector and non-vector species. In order to detect useful molecular characters for the taxonomic determination of three potential vectors of Leishmania present in the Valle de Aburrá, Colombia, the present work sequenced the 3' end of the mitochondrial cytochrome b gene in Lutzomyia hartmanni (Fairchild and Hertig), L. columbiana (Ristorcelli and Van Ty), and L. tihuiliensis Le Pont, Torrez-Espejo and Dujardin. Polymorphic sites, pairwise genetic distances (p), and entropy were determined from the multiple alignment of the nucleotide sequences. Numbers of silent and non silent substitutions were calculated from the amino acid sequences deduced from the nucleotide sequences of the gene. In the multiple alignment of the cytochrome b nucleotide sequences from Lutzomyia hartmanni, L. columbiana and L. tihuiliensis, 83 polymorphic sites were detected. A total of 18 amino acid replacements were found in the partial nucleotide sequences of the protein. Genetic distances varied from 0,137 between L. tihuiliensis and L. columbiana, to 0,215 among L. columbiana and L. hartmanni. Nucleotide and amino acid sequence polymorphisms within the cytochrome b gene and protein, respectively, constitute molecular characters potentially useful for the taxonomic determination of these sand fly species.

En Colombia están registradas 143 especies de Lutzomyia França, pero menos del 7% de éstas se encuentran incriminadas como vectores de Leishmania spp. Debido a la alta semejanza morfológica de algunas especies vectoras con otras no vectoras, se necesitan caracteres taxonómicos alternativos para identificar correctamente los flebotomíneos de cada zona geográfica del país. Con este objetivo, en el presente trabajo se secuenció el extremo 3' del gen mitocondrial que codifica para la proteína citocromo b en tres vectores potenciales de Leishmania presentes en el valle de Aburrá, Colombia, Lutzomyia hartmanni (Fairchild y Hertig), L. columbiana (Ristorcelli y Van Ty) y L. tihuiliensis Le Pont, Torrez-Espejo y Dujardin. A partir del alineamiento múltiple de nucleótidos se determinaron los sitios polimórficos, las distancias genéticas pareadas netas (p) y la entropía. Las secuencias de nucleótidos fueron trasladadas a aminoácidos para estimar el número de sustituciones sinónimas y no sinónimas. En el alineamiento múltiple de 321 nucleótidos del gen citocromo b de L. columbiana, L. hartmanni y L. tihuiliensis se detectaron 83 sustituciones. En la secuencia parcial de la proteína se encontraron 18 reemplazos de aminoácidos. Las distancias genéticas interespecíficas fluctuaron en un rango mínimo de 0,137 entre L. tihuiliensis y L. columbiana, y un máximo de 0,215 entre L. columbiana y L. hartmanni. Los polimorfismos detectados en la secuencia de nucleótidos del gen y de aminoácidos de la proteína constituyen caracteres moleculares potencialmente útiles para la determinación taxonómica de estas especies de flebotomíneos.